SuperSYBR Mixture（With Low ROX）

SuperSYBR Mixture（With Low ROX）是專用于染料法（SYBRGreenⅠ）實時熒光定量 PCR 的預混體系，濃度為 2×，包含 SuperStarTaq DNA Polymerase、PCR Buffer、dNTPs、SYBR Green I 熒光染料、Mg2+和 ROX 校正染料，操作簡單方便。主要用于基因組 DNA 靶序列和 RNA 反轉(zhuǎn)錄后 cDNA 靶序列的檢測。本品含有的 SuperStar Taq DNA Polymerase 是一種經(jīng)化學修飾的、全新高效熱啟動酶，在常溫下沒有聚合酶活性，有效避免在常溫條件下由引物和模板非特異性結合或引物二聚體而產(chǎn)生的非特異性擴增，酶的激活須在 95℃下孵育 10 分鐘。產(chǎn)品特點本產(chǎn)品中使用了全新高效熱啟動酶 SuperStar Taq DNA Polymerase與 PCR 緩沖體系，顯著提高 PCR 的擴增效率，具有高靈敏度和特異性強的特點。注意事項1. 使用前請上下顛倒輕輕混勻，盡量避免起泡，并經(jīng)短暫離心后使用。2. 本產(chǎn)品中含有 SYBR Green I 熒光染料和 ROX 染料，保存本產(chǎn)品或配制 PCR 反應液時應避免強光照射。3. 如需頻繁使用，可存放于 2-8℃，盡量避免反復凍融，反復凍融可能使產(chǎn)品性能下降。使用方法以下舉例為常規(guī) PCR 反應體系和反應條件，實際操作中應根據(jù)模板、引物結構和目的片段大小不同進行相應的改進和優(yōu)化。

1. PCR 反應體系(以 50ul 反應體系為例)

   

2. PCR反應程序建議采用下表顯示的兩步法 PCR 進行程序設定，本程序是以 ABI7500熒光定量 PCR 儀為例。若因 Tm 值較低的引物等原因，得不到良好的實驗結果時，可嘗試進行三步法 PCR 擴增。

注意：1）退火溫度請以 60-64℃作為設定范圍的參考，發(fā)生非特異性反應時，可提高退火溫度。2）本說明是以 ABI 7500 熒光定量 PCR 儀為參照設定，融解曲線分析請以所使用的熒光定量 PCR 儀推薦的程序進行設定。3. 三步法熒光定量PCR（本程序是以ABI7500熒光定量PCR儀為例）：

注意：1）本產(chǎn)品所采用的熱啟動酶須在預變性 95℃、10 min 條件下實現(xiàn)酶的活化。2）無法得到理想的擴增效率時，適當降低退火溫度；發(fā)生非特異性反應時，提高退火溫度，由此優(yōu)化反應條件。3）若需提高反應擴增效率，可適當增加延伸時間。4）本說明是以 ABI 7500 熒光定量 PCR 儀為參照設定，融解曲線分析請以所使用的熒光定量 PCR 儀推薦的程序進行設定。

特點:高效 熱啟動適用范圍:熒光定量 PCR保存條件：-20℃避光保存

本產(chǎn)品僅供科研使用，請勿用于臨床診斷及其他用途

上海牧榮生物科技有限公司

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SuperSYBR Mixture（With Low ROX）